Magline组氨酸标记重组蛋白纯化试剂盒适用于微量细胞裂解液中组氨酸标记重组蛋白的快速分离纯化。样品处理量为50个。它利用表面鳌和
Ni2+
的
AffiMag
磁性硅胶微球为固相吸附剂,在经过优化的条件下,对细胞裂解液中的重组蛋白进行吸附、洗涤和洗脱,从而得到纯化的重组蛋白。利用
AffiMag
磁分离架对固定化金属离子亲和介质磁性微球进行定位操作,大大地简化了蛋白纯化的操作步骤,缩短了分离时间,尤其适合于微量样品的分离纯化和重组菌的高通量筛选。采用本试剂盒从生物样品中提取重组蛋白通常在
1
小时内即可完成,从每毫升细胞培养液中提取纯化蛋白的收率通常在
20-40 μg
,其纯度可达
90 % 以上。
MagLine
系列重组蛋白提取试剂盒可以取代传统的亲和凝胶色谱柱用于大肠杆菌中表达的重组蛋白的快速筛选和含量测定。
Magline
组氨酸标记重组蛋白纯化试剂盒的工作原理是基于固定在磁珠表面的过渡金属离子如
Ni2+
,Cu2+
与重组蛋白中的组氨酸标签之间的相互作用,将目标蛋白选择性地吸附到磁珠表面。利用强磁铁可以进一步简化磁珠与细胞裂解产物中杂质的分离。细胞裂解液中蛋白纯化操作由吸附,洗涤和洗脱三个步骤组成。纯化效率与培养液中组氨酸标记蛋白的浓度有关。为了获得最佳结果,我们建议根据起始原料中的组氨酸标记蛋白的浓度选择磁珠用量。在每次纯化中所使用的磁珠的蛋白结合容量应该大于被纯化的组氨酸标记蛋白的量。
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